美國(guó)Warner公司的平面脂雙層工作站(The Planar Lipid Bilayer Workstation――BLM Workstation)是測(cè)量跨越人工平面脂雙層膜電流的理想工具,用于測(cè)量平面脂雙層通道電流的工作站!
BLM工作站包括如下設(shè)備
Bilayer clamp amplifier (BC-535 脂雙層膜片鉗放大器)
8-pole Bessel filter (LPF-8 8-極Bessel濾波器)
BLM Starter Kit (BLM-ST BLM初裝工具盒)
Headstage holder (HST-1 探頭夾持器)
Data acquisition system and software (數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)與軟件)
Integrated controller for stirplate and lamp (SUN Stir-3 雙層膜攪拌盤(pán)與鹵素?zé)艟C合控制系統(tǒng))
Instrument rack (RAC-14 儀器架)
Perfusion system (BPS-2 灌流系統(tǒng))
Faraday cage and Vibration Isolation Table (FC Series 法拉第籠,即屏蔽網(wǎng)和防震臺(tái))
工作原理及各組成部分的詳細(xì)介紹
1. 脂雙層膜片鉗放大器(Bilayer clamp amplifier)
高質(zhì)量的放大器**是記錄單一通道電流必需的設(shè)備。要求放大器必須能識(shí)別并從電噪聲中分離記錄到微小的電流。脂雙層膜片鉗放大器的探頭采用的是復(fù)雜一些 的電容反饋電路,這種電路極大地?cái)U(kuò)展了信號(hào)的頻帶寬。由于脂雙層膜很少能產(chǎn)生大于200pA的電流,因此由這種電路帶來(lái)的在通過(guò)大電流時(shí)產(chǎn)生的噪聲得以去 除。
2. 8-極Bessel濾波器(8-pole Bessel filter)
要想能夠從高幅、高頻噪聲中分辯并記錄出波動(dòng)的通道電流,對(duì)放大器輸出的電流進(jìn)行濾波是所必需的。正確地施加濾波是非常重要的,因?yàn)閷?duì)電流數(shù)據(jù) 的過(guò)度濾波會(huì)使通道的門(mén)控事件產(chǎn)生失真。脂雙層膜片鉗放大器提供4-極Bessel濾波器,通過(guò)1、2、5檔調(diào)節(jié)濾波頻 率,濾波頻率范圍為50-20k Hz。
為獲得對(duì)信號(hào)濾波的更好效果,本工作站配有LPF-8型8-極低通Bessel濾波器供使用者選擇。
3. 膜支撐系統(tǒng)(Membrane support)
通常采用各種不同的塑料支撐裝置(如杯子、巴士德吸管**、聚四氟乙烯薄、片、塑料隔片等)來(lái)形成平面脂雙層工膜。我們的脂雙層工作站采用不同容 量、尺寸和孔徑大小的灌流杯(Bilayer cup)與記錄槽(Bilayer recording chamber)作為支撐裝置??讖酱笮。茨っ娣e大?。┓浅V匾?,太大則電噪聲大而且膜的脆性大,膜容易破碎;太小雖然膜的堅(jiān)固性好,電容噪聲小,但嵌 入膜上的離子通道(受體)少。*佳孔徑大小和幾何形狀通常需要在實(shí)驗(yàn)中摸索。形成平面脂雙層的通常策略是將脂質(zhì)(一般溶解在癸烷中)刷涂過(guò)支撐系統(tǒng)上的小 孔,多余的脂質(zhì)會(huì)離開(kāi)小孔,在疏水壓作用下,留在孔內(nèi)的脂質(zhì)形成平面脂雙層結(jié)構(gòu)。
4. 灌流系統(tǒng)(Perfusion system)
灌流換液用于改變?nèi)芤撼煞帧⑹┘?通常施加在膜上嵌入通道(受體)后。好的灌流系統(tǒng)要求在更換溶液時(shí)不能干擾記錄過(guò)程、不能打破質(zhì) 膜,同時(shí)要求快速和便于操作。灌流系統(tǒng)按照工作機(jī)制分為重力灌流、泵灌流、手工或儀器控制的施加壓力灌流等幾種。
5. 攪拌設(shè)備(Stirring system)
記錄槽內(nèi)進(jìn)行攪拌對(duì)結(jié)果的可重復(fù)性是很重要的,尤其是在施加通道(受體)激動(dòng)劑或阻斷劑時(shí),能保證**的充分作用。此外,攪拌可能通過(guò)振動(dòng)脂雙層或持續(xù)將新囊泡融入膜表面而促進(jìn)脂質(zhì)囊泡的融合。對(duì)攪拌系統(tǒng)的要**它不能帶來(lái)機(jī)械震動(dòng)和電噪聲。
6. 法拉第籠(Faraday cage)
法拉第籠用于屏蔽放大器探頭,防止電磁干擾的影響。這些電磁干擾來(lái)自于附近的設(shè)備。通常將探頭與膜支撐設(shè)備(灌流杯、記錄槽)放置在法拉第籠 內(nèi),灌流系統(tǒng)、攪拌設(shè)備既可放置在籠子內(nèi),也可放在籠子外。
法拉第籠通常采用銅網(wǎng)或鋁網(wǎng),骨架用鋁材。膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,一般以籠罩的形式將法拉第籠放置在防震臺(tái)的周?chē)?,與防震臺(tái)不接觸,但也可直接放置在防 震臺(tái)上。我公司配置的FC系列法拉第籠的尺寸(高度x寬度 x深度)是63.5 x 55.9 x 45.7 cm,是直接安裝在桌型防震臺(tái)上的,占用的實(shí)驗(yàn)室空間很小。FC系列法拉第籠的正面是扇形門(mén),兩側(cè)面各有小門(mén),后面設(shè)有各種電線(xiàn)進(jìn)出籠子的小孔,且在后壁 上有一個(gè)黃銅塊作為各個(gè)儀器設(shè)備接地用的公共地。
7. 防震臺(tái)(Vibration Isolation table)
我公司采用的防震臺(tái)有主動(dòng)充氣與被動(dòng)充氣兩種,面積約為40 x 48cm,表面為鋼面,具磁性,可在其上通過(guò)磁性固定一些設(shè)備。其與法拉第籠組合在一起。
8. 探頭夾持器(Headstage holder)
探頭的輕微震動(dòng)可導(dǎo)致快速波動(dòng)的漂浮電容出現(xiàn),表現(xiàn)為放大器輸出的噪聲增加。通過(guò)將探頭固定在防震支架上可防止探頭的震動(dòng)。我公司采用HH-1探頭夾持器,通過(guò)磁力表座固定在防震臺(tái)面上,起到固定探頭的作用。
9. 照明系統(tǒng)(Illumination system)
屏蔽網(wǎng)內(nèi)的照明系統(tǒng)可對(duì)支撐系統(tǒng)中的膜形成小孔進(jìn)行照明,有助于在灌流杯中形成雙層脂膜時(shí)的操作。理想狀態(tài)下,照明燈不能引入電噪聲和加熱被照 明的物體。我公司的SUN-1照明燈為鹵素直流燈,不帶來(lái)電噪聲,且其發(fā)出的60%的熱量都能通過(guò)固定裝置及時(shí)得到擴(kuò)散。
10. BLM初裝工具盒(BLM Starter Kit)
用于完成系統(tǒng)的安裝。包括如下內(nèi)容:(1)3根BNC線(xiàn);(2)幾根地線(xiàn);(3)3支毛刷(尺寸0-000);(4)玻璃毛細(xì)管(加脂質(zhì)用);(5)灌流用PE管;(6)攪拌棒(2 x 5 mm或2 x 7 mm)。
11. 數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)與軟件(Data acquisition system and software)
數(shù)據(jù)的采集包括A/D轉(zhuǎn)換器與采樣軟件(早期也使用繪圖儀、示波器等)。
12. 儀器架(Instrument rack)
RAC-14型儀器架是一個(gè)14英寸的桌面型儀器架,用于放置放大器、濾波器、攪拌-照明控制儀、A/D轉(zhuǎn)換器。附帶接地線(xiàn)用于連接電源調(diào)節(jié)器。
常用型號(hào):
電子離合器
5215-133
5218-434
??ACM114T-1.1
??TCS-210
??ERS-49 5155-541-002
??5302-111-021
??Armature TB-1000
??326-17-010
??5304-111-005
??5314-631-022
??TB-1525
??5103-451-020
??5300-541-004
??SF-250
??EP-250 90V
??5300-111-002
??MCS-203
??305-27-001
上一篇:比例閥的使用方法
下一篇:比例閥的分類(lèi)